8 (383) 2 999 245
Компания Биосилика - наборы для выделения ДНК и РНК

DgPPol Pfu ДНК-полимераза

Термостабильная Pfu ДНК-полимераза выделена из E. сoli-продуцента, несущего рекомбинантный ген из Pyrococcus furiosus. Фермент, катализирует матричный синтез ДНК за счет переноса нуклеотида от dNTP на 3' конец молекулы ДНК. Обладает 3'-5' экзонуклеазной активностью, что значительно повышает точность синтеза ДНК по сравнению с Taq ДНК-полимеразой (более чем в 20 раз).

Кат. № Объем Инструкция Цена Количество
DgPPol-1U 1 ед/мкл, 1000 ед., 10х буфер в комплекте 1 300 о В корзину
Товар добавлен в корзину
DgPPol-5U 5 ед/мкл, 1000 ед., 10х буфер в комплекте 1 000 о В корзину
Товар добавлен в корзину

Термостабильная Pfu ДНК-полимераза выделена из E. сoli-продуцента, несущего рекомбинантный ген из Pyrococcus furiosus. Фермент, катализирует матричный синтез ДНК за счет переноса нуклеотида от dNTP на 3′ конец молекулы ДНК. Обладает 3′-5′ экзонуклеазной активностью, что значительно повышает точность синтеза ДНК по сравнению с Taq ДНК-полимеразой (более чем в 20 раз). Фермент широко применяется в различных приложений, где требуется высокая точность синтеза ДНК. Рекомендуется для клонирования ДНК, методик с использованием мегапраймеров, амплификации фрагментов ДНК с целью последующего секвенирования. Не добавляет на 3′ конец ампликона остаток аденина, что позволяет использовать Pfu ДНК-полимеразу для достройки «липких» концов ДНК. Pfu полимераза не включает в ампликон урацил. Максимальная длина амплифицированного фрагмента может достигать 35000 п.н.

За одну единицу активности (ед.) принимали количество фермента, необходимое для включения 10 нмолей dNTP в кислотонерастворимую фракцию за 30 минут при 72oC.

Условия хранения

-200C

Контроль качества

ПЦР (активность), SDS-PAGE (качество очистки фермента), тест на нуклеазную активность, тест хранения при 25оС, тест на контаминацию E. сoli.

Буфер хранения

50 mM Tris-HCl (pH 8.2), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 100 mM KCl, 0.1% Nonidet P40, 0.1% Tween 20, 50% glycerol

Реакционный буфер

LSB

Применение

  • Высокоточная ПЦР
  • Получение длинных ПЦР-фрагментов
  • Достройка «липких» концов ДНК
  • Получение зондов и модифицированных ДНК-конструкций

Рекомендуемые условия реакции

  • Используйте 1-4 ед фермента на 100 мкл реакционной смеси
  • Конечная концентрация трифосфатов в реакционной смеси – 0.1-0.2 mM
  • Стадию элонгации проводить при 720С, скорость амплификации составляет 1000-2000 п.о./мин.
Dg-PPol-1U Dg-PPol-5U
Pfu ДНК-полимераза 1 ед/мкл, 1 000 ед. + 10х буфер LSB 5 ед/мкл, 1000 ед. + 10х буфер LSB
Инструкция «DgPPol-1U, Биосилика»
Инструкция «DgPPol-5U, Биосилика»