8 (383) 2 999 245
Компания Биосилика - наборы для выделения ДНК и РНК

Набор для выделения ДНК из реакционных смесей

Наборы серии RCD на основе спин-микроколонок предназначены для быстрой очистки ДНК после ферментативных реакций (рестрикция, лигирование, ПЦР и пр.). В ходе очистки удаляются одноцепочечные олигонулеотиды, dNTP, соли, ферменты. Набор позволяет выделять фрагменты ДНК размером от 20 п.н. до 15 т. п. н.. Выход ДНК – до 95%. Выделенная ДНК пригодна для всех стандартных молекулярно-биологических процедур, спектральные характеристики препаратов A260/280=1,8-2,0. Емкость микроколонки по ДНК - до 25 мкг. Длительность процедуры – 7 минут. Условия хранения – при комнатной температуре. Срок годности – 12 месяцев.

Кат. № Объем Инструкция Цена Количество
RCD-50 50 выделений 1 872 о В корзину
Товар добавлен в корзину
RCD-100 100 выделений 2 886 о В корзину
Товар добавлен в корзину

Наборы серии RCD на основе спин-микроколонок предназначены для быстрой очистки ДНК после ферментативных реакций (рестрикция, лигирование, ПЦР и пр.). В ходе очистки удаляются одноцепочечные олигонулеотиды, dNTP, соли, ферменты. Набор позволяет выделять фрагменты ДНК размером от 20 п.н. до 15 т. п. н.. Выход ДНК – до 95%. Выделенная ДНК пригодна для всех стандартных молекулярно-биологических процедур, спектральные характеристики препаратов A260/280=1,8-2,0. Емкость микроколонки по ДНК — до 25 мкг. Длительность процедуры – 7 минут. Условия хранения – при комнатной температуре. Срок годности – 12 месяцев.

Наборы позволяют выделять ДНК:

  • Быстро – процедура занимает 7 минут
  • Эффективно и универсально – до 90%, от 50 до 15000 п.н.
  • Качественно – A260/280=1,8-2,0, выделенная ДНК пригодна для любых молекулярно-биологических реакций
  • Технологично и просто – требуется только стандартное лабораторное оборудование (настольная центрифуга и микропипетки)

Применение

Препараты ДНК, выделенные наборами RCD, могут быть использованы в стандартных молекулярно-биологических процедурах, таких как:

  • Гидролиз эндонуклеазами рестрикции
  • ПЦР
  • Секвенирование
  • Кинирование, дефосфорилирование

Принцип действия

Очистка ДНК на микроколонках Биосилика начинается с избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли, последующей отмывки связанной ДНК от примесей, и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК.

Сорбент, изготовленный по запатентованной технологии, позволяет выделять до 25 мкг свободной от примесей ДНК. Растворы, входящие в состав наборов, обеспечивают высокий выход и чистоту конечного препарата ДНК.

Отмывка ДНК, связанной с колонкой, происходит в присутствии 80% этанола. Эффективность сорбции ДНК зависит от значения pH. Связывание ДНК с сорбентом происходит при pH < 7,5, а элюция ДНК — при pH > 7,5. Элюция ДНК проводится буфером, содержащим 10 мМ Трис, рН = 8,5. Оптимальный объем элюции — 50 мкл.

Элюция меньшим объемом (не рекомендуется элюировать менее чем 30 мкл) повышает концентрацию ДНК в конечном препарате, вместе с тем увеличиваются потери (выход 60 — 70%).

Буфер Y содержит индикатор кислотности, при оптимальном pH индикатор имеет желтый цвет. Если после добавления к образцу Буфера Y, цвет индикатора отличается от желтого, к смеси необходимо добавить 10 мкл NaAc (3,0 М pH 5,0).

Срок годности и условия хранения

  • Срок годности – 12 месяцев
  • Компоненты набора хранить при комнатной температуре

Контроль качества

Наборы тестируются путем выделения фрагментов (50 п. н. и 7 т.п.н.) ДНК в соответствии с протоколом. Качество полученных препаратов ДНК оценивается при помощи спектрофотометрии, гель-электрофореза, гидролиза рестриктазами и последующего молекулярного клонирования.

RCD-50 RCD-100
Микроколонки 50 шт 100 шт
2 мл пробирки 50 шт 100 шт
Буфер Y 30 мл 60 мл
Буфер W 8 мл 15 мл
Буфер E 5 мл 10 мл
Инструкция 1 шт 1 шт
Инструкция «RCD-50, Биосилика»
Инструкция «RCD-100, Биосилика»
Проблема — мало ДНК на выходе
Возможная причина

pH раствора не оптимален для связывания ДНК с сорбентом

Решение

Обратите внимание на цвет индикатора. Если он отличается от желтого, добавьте 10 мкл NaAc 3.0 M pH 5,0

Возможная причина

Перед стадией элюции на полностью удалены остатки Буфера W

Решение

Обратите внимание на пункт о дополнительном центрифугировании

Фирменные растворы для выделения ДНК и РНК

 Кат. номер Название, объем Цена
BY-60 Буфер Y, 60 мл 1 600 о
BW-15 Буфер W, 15 мл (концентрат) 500 о
BE-20 Буфер E, 20 мл 400 о

Все растворы